Study of Design and Development for Logistics Infrastructure and Integrated Information System and Guidelines of Healthcare Big Data for Thailand Digital Economy Phase II
October 24, 2019
Urinary Luteinizing Hormone (LH) Levels in Male Athletes during 3 – Years Routine Doping Control Analysis at the NDCC Bangkok
October 24, 2019

Application of LC/MS – IT – TOF for Screening of WADA Prohibited Doping Peptides

Application of LC/MS – IT – TOF for Screening of WADA Prohibited Doping Peptides

National Doping Control Centre, Mahidol University

Title :

Application of LC/MS – IT – TOF for Screening of WADA Prohibited Doping Peptides

Researchers :

Saardpun N., Asawesna C., Wilairat P., Kusamran T., Kongpatanakul S.

Growth hormone releasing peptides (GHRPs) are synthetic substances which stimulate growth hormone (GH) secretion and are clinically used for the treatment of GH deficiency. GHRPs and other short peptides have been included since March 2016 in World Anti-Doping Agency (WADA) Prohibited List in class S2 as they enhance athletic performance. The purpose of this work was to develop the use of LC/MS-IT-TOF for screening of GHRPs and related substances. Solid phase extraction with a weak-cation exchange (WCX) cartridge was employed for sample preparation of 11 target peptides (GHRP-1, GHRP-2, GHRP-4, GHRP-5, GHRP-6, TB500, Desmopressin, Ipamorelin, Hexarelin, Anamorelin and Alexamorelin). The combined elutions of methanol (Elution 1) and 5% formic acid in methanol (Elution 2) were evaporated under vacuum and the residue reconstituted in water: acetonitrile (90:10, v/v) mixture. Chromatographic separation and mass characterization were performed using a Hypersil Gold C18 column (50 mm, 2.1 mm, 3m) and the Shimadzu LCMS-IT-TOF mass spectrometer. Gradient elution was from 5% to 100% acetonitrile at a flow rate of 0.3 ml/min with total run time of 18 min. Method validation was performed with optimized parameters in the positive mode. The assay limit of detection was 0.2-1.0 ng/mL and the recovery ranged from 9.1 to 53.6%. The instrument precision at 2 ng/mL was 3.2-14.6% RSD. This developed method demonstrates the application of LC/MS-IT-TOF for screening of the WADA prohibited short peptides. Furthermore, modifications of the procedure can be applied for analysis of other prohibited peptides and metabolites.

Figure 1 : PRD chromatograms from LC/MS - IT - TOF of 11 target compounds and ISTD in a spiked control urine at 2 ng/mL.
Table 1 : Mass spectrometry information of the screening method for 11 doping peptides by LC/MS - IT - TOF.
Table 2 : Results of method validation for the screening of 11 doping peptides by LC/MS - IT - TOF at MRPL level (2 ng/mL).

Publishing :
Recent Advances in Doping Analysis (25) Proceeding of the Manfred Donike Workshop 35th Cologne Workshop on Dope Analysis. 5th to 10th March 2017, page 120-123.

Key Contact Person :
Mrs.Morakot Kaewklum
National Doping Control Centre, Mahidol University
+66 2 354 7149 – 50

เว็บไซต์นี้ใช้คุกกี้เพื่อทำให้คุณมีประสบการณ์ที่ดีในการใช้งานเว็บไซต์ โปรดคลิก "ยอมรับ" หรือสามารถจัดการความเป็นส่วนตัวเองได้เองโดยคลิกที่ ตั้งค่า

Privacy Preferences

นโยบายความเป็นส่วนตัว เว็บไซต์ของมหาวิทยาลัยมหิดลใช้คุกกี้เพื่อจำแนกผู้ใช้งานแต่ละคน โดยทำหน้าที่หลักคือประมวลทางสถิติ ตลอดจนลักษณะเฉพาะของกลุ่มผู้ใช้บริการนั้นๆ ซึ่งข้อมูลดังกล่าวจะนำมาใช้ในการวิเคราะห์รูปแบบพฤติกรรมของผู้ใช้บริการ และมหาวิทยาลัยจะนำผลลัพธ์ดังกล่าวไปใช้ในการปรับปรุงเว็บไซต์ให้ตอบสนองความต้องการ และการใช้งานของผู้ใช้บริการให้ดียิ่งขึ้น อย่างไรก็ตามข้อมูลที่ได้และใช้ประมวลผลนั้นจะไม่มีการระบุชื่อ หรือบ่งบอกความเป็นตัวตนของผู้ใช้บริการแต่อย่างใด อีกทั้งไม่มีการเก็บข้อมูลส่วนบุคคล เช่น ชื่อ, นามสกุล, อีเมล เป็นต้น และใช้เป็นเพียงข้อมูลทางสถิติเท่านั้น ซึ่งจะช่วยให้มหาวิทยาลัยสามารถมอบประสบการณ์ที่ดีในการใช้งานเว็บไซต์สำหรับคุณ และช่วยให้สามารถปรับปรุงเว็บไซต์ให้มีประสิทธิภาพยิ่งขึ้นได้ในเวลาเดียวกัน ทั้งนี้คุณสามารถเลือกตัวเลือกในการใช้งานคุกกี้ได้

Allow All
Manage Consent Preferences
  • Always Active